双分子荧光互补实验(BiFC)
一、技术简介
双分子荧光互补(Bimolecular Fluorescent Complimentary, BiFC)技术是指通过具有相互作用亲和力的两个蛋白质,将分别与其相连的荧光蛋白片段拉近,组装成完整的荧光蛋白,从而表征蛋白质相互作用的发生及其空间位置。
二、实验流程
1. 挑取单克隆于LB液体培养。
2. 将农杆菌转接到LB液体培养基中(加有与1相同的抗生素)。加入乙酰丁香酮和MES,28度摇床培养。
3.离心收集菌体。
4. MgCl2重悬菌体加入AS。
5. 取正处于生长期的烟草叶片,使用针头在叶片反面扎些小孔。
6. 将侵染液装入5 ml 注射器内,用拇指按压注射器反板将液体从叶片下表皮注射到烟草叶片内。注射后,烟草叶片会出现湿润的现象。本实验为BiFC 验证实验,注射前需将组合农杆菌进行混合。
7. 注射后72小时,取样通过激光共聚交荧光显微镜检测荧光信号。
三、结果展示
四、服务流程
五、服务说明及结果
1.客户提供:培养好的细胞和作用药物。
2.公司提供:原始数据及分析结果、完整的实验报告。
3.实验周期:10个工作日,具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定