实时荧光定量PCR(real-time PCR)
一、技术简介
实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。
Real-timePCR是在PCR扩增过程中,通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。
二、实验流程
1.提取RNA。
2.DNAse l消化样品RNA中的DNA。
3.RNA琼脂糖凝胶电泳。
4.RNA反转录为cDNA。
5.cDNA与引物质量检测。
6.利用相对定量的方法分析目的基因表达量的情况。
7.定量PCR检测。
8.分析扩增曲线和溶解曲线。
三、结果展示
四、服务流程
五、服务说明及结果
1.客户提供:样本。
2.公司提供:高质量的RNA、RNA电泳图、扩增曲线图、熔解曲线图、完整报告。
3.实验周期:5-10个工作日。