外泌体透射电镜检测

一、技术简介

      外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为30-200 nm，形态也呈现出多样性，有研究分为9个类别依次为∶单囊泡、双囊泡、多膜泡、小双层膜泡、椭圆膜囤、小管、大管、不完整的膜泡、不规则膜泡，其中在不同类别的囊泡中可以发现三个附加特征:表面具涂层的膜泡、内含纤维的膜泡、电子致密囊泡

本司采取通过透射电镜确定外泌体大小。

二、实验流程

(1) 提取的外泌体溶于 50-100µl 2%多聚甲醛溶液中（可在 4℃储存一周）。

(2) 取 5-10µl 外泌体溶液加到 Formvar-carbon 载样铜网上。

(3) 取 100µl PBS 加到封口膜上，用镊子将铜网（Formvar 膜面朝下）放在 PBS 液滴上清 洗。

(4) 将铜网放在 50µl 1%戊二醛液滴上 5 分钟。 (5) 将铜网放在 100µl ddH2O 洗 2 分钟 (洗 8 次)。

(6) 将铜网放在 50µl 草酸双氧铀液滴上（pH7.0）5 分钟。

(7) 将铜网放在 50µl 甲基纤维素液滴上 10 分钟，冰上操作。

(8) 铜网放到样品台顶端的不锈钢环上，在滤纸上吸去多余液体。

(9) 空气干燥 5-10 分钟。

(10)将铜网放在样品盒里，120kV 下拍摄电镜照片。

三、结果展示

四、服务流程

五、服务说明及结果

1.客户提供:外泌体(30 ul)或由我司分离得到外泌体。

2.公司提供:基本实验步骤、图片。

3.实验周期:15个工作日。